Prostat karsinoma hücrelerinde KNK437’nin termotolerans ve apoptozise etkisi

Abstract

Prostat kanseri ölümle sonuçlanabilen yaygın bir kanser türüdür. Prostat kanserinde de kullanılabilen hipertermik tedavi, tümörlü bölgenin yüksek sıcaklığa (41-45°C) maruz bırakıldığı bir kanser terapisidir. Isı şok proteinlerinin termotoleransta rol aldığı ve özellikle Hsp70 düzeylerindeki artışın, sonraki ısı uygulamalarında hücreleri koruyucu mekanizma olarak termotoleransı indüklediği bildirilmiştir. Quercetin ve KNK437'nin termotoleransı ve Hsp70'i inhibe edici özelliklere sahip olduğu bazı kanser hücrelerinde gösterilmiştirBu çalışmanın amacı, KNK437'nin prostat karsinoma hücrelerinde termotolerans gelişimine ve apoptozise etkilerini araştırmak ve elde edilen bulguları, Quercetin ile karşılaştırmaktır. Bu amaçla, KNK437 veya Quercetin ile ön muamele edilmiş ve hipertermi uygulanmış olan prostat karsinoma hücre dizilerinde (PC-3, DU145 ve LNCaP) koloni oluşumu deneyi ile termotolerans gelişimi, real time RT-PCR deneyi ile Hsp70 mRNA düzeyleri, sandwich ELISA metodu ile Hsp70 protein düzeyleri, metil tetrazolyum boyası yardımıyla canlı hücre yüzdeleri, Annexin-V bağlanma deneyi ile akış sitometri cihazında apoptozis düzeyleri ve Western blot deneyi ile Prokaspaz-3 ve PARP protein düzeyleri ölçülmüştürÇalışmamızda, KNK437 ve Quercetinin, PC-3 ve DU145 hücrelerinde oluşturulmuş termotoleransı doza bağlı olarak inhibe ettikleri ve bu inhibisyonda KNK437'nin Quercetin'den daha etkili olduğu görülmüştür. KNK437 ve Quercetin, hipertermik hücrelerde Hsp70 mRNA ve Hsp70 protein düzeylerini anlamlı olarak düşürmüştür. KNK437 ve Quercetinin hipertermiden kaynaklanan sitotoksisiteyi ve apoptotik hücre yüzdesini doza bağlı olarak daha da arttırdığı bulunmuştur. KNK437 ve Quercetinin apoptotik yolakta yer alan kaspaz-3 aktivasyonunu ve PARP düzeylerini her üç hücre dizisinde arttırdığı görülmüştürBu çalışma prostat kanseri tedavisinde unutulmuş veya henüz etkin bir şekilde kullanılamamış olan hipertermik tedavi yönteminin önemini vurgulamaktadır. Prostat karsinoma hücrelerinde KNK437 ilk defa incelendiği için elde edilen her bir sonuç literatüre önemli katkılarda bulunacaktır. Ayrıca, termotolerans ve Hsp70 inhibitörü olan KNK437'nin kullanılması, daha az toksik ve yan etkisi az olan hipertermik tedaviyi daha etkin hale getirebilir.