Use of CRISPR/Cas9 system to produce a marker-free rice

Abstract

Artan dünya nüfusu nedeniyle yeni ve yüksek verimli tarım ürünlerine ihtiyaç duyulmaktadır. Moleküler ıslah teknikleri ıslah sürecini hızlandırmıştır. Bununla birlikte bitkilerde transformasyon etkinliği çok düşüktür ve bu nedenle bilim insanları transforme olmuş hücre veya dokuları olmanyanlardan ayırmak için markör genler kullanırlar. Markör genler antibiyotik veya herbisitlere direnç sağlayan proteinleri kodlarlar. Bu markör genler genellikle bakteriyel kaynaklardan elde edildiği için markör genler hakında birçok biyogüvenlik endişeleri mevcuttur. Bu endişeler sebebiyle birçok biliminsanı transgenik bitkinin genomundan markör geni uzaklaştırmak için türlü yaklaşımlar denemişlerdir. Fakat bu yaklaşımların çoğu zaman alıcıdır ve bir takım zorlukları vardır. Bu durum markör gen uzaklaştımada yeni ve basit yaklaşımların ortaya çıkmasını gerektirmiştir. Bu çalışmada bölge-spesifik nükleazların son üyesi olan CRISPR/Cas9 tekniğini kullanarak NPT (Neomisin fosfotransferaz) markör genini transgenik çeltik genomundan uzaklaştırılabilirliğini göstermek üzere çalışmalar yapılmış olup transformasyon etkinliğin çok düşük olması sebebiyle pozitif sonuç alınamamıştır.