Abstract:
Antikanser ajanlara karşı direnç birçok tümörün karakteristik özelliğidir. Bir ilaca karşı direnç genellikle o ilaçta kimyasal yapı ve hücresel hedef bakımından farklı ilaçlara karşı da direnç gelişmesiyle beraberdir. Bu olaya çoğul ilaç direnci (ÇİD) denir. Tümör hücrelerinin çoğul ilaç direnci nedenlerinden biri Çoğul İlaç Direnci-ilişkili Protein Tin (MRP1) ekspresyonu ile birlikte oluşur. Bir küçük hücreli akciğer kanseri hücre dizisinde keşfedilen MRP1 taşıyıcı proteinlerin ATP bağlanan kaset (ABC) süperailesine ait olup, 190 kDa ağırlığında bir integral membran proteinidir. MRP1, antrasiklinlere, vinca alkalo idlere ve epipodofilotoksinlere karşı hücresel direnç sağlar ve primer olarak bir multispesifik organik anyon taşıyıcısı olarak düşünülmektedir. Böbrek tümörlerinin çeşitli antikanser ilaçlara karşı dirençli oldukları bilinmektedir, MRP1 ve böbrek tümörlerinin antikanser ilaçlara karşı hassasiyeti arasındaki ilişkiyi açığa çıkarmak için MRP1 genini ( pcDNA3.1/MRPK ) kalsiyum fosfat transfeksiyon metoduna göre İnsan Embryonal Böbrek (HEK) 29S hücrelerine transfekte ettik. MRP1 transfekte edilen hücreleri seçmek için besi yerine geneticin (400ug/mı) eklendi. MRP1 transfekte varyantlar 293 MRP olarak adlandırıldı. Western Blot ve Flow Sitometrik analizler 293 MRP hücrelerinde MRP1 ekspresyonun varlığını gösterdi. HEK293 hücrelerinde ise, MRP1 ekspresyonu belirlenmedi. MRP1 proteininin fonksiyonel olduğunu ve ilaç direnciyle ilişkili olduğunu göstermek için her iki hücre dizisi de doxorubicin, etoposide, vincristine, gemcitabine, 5-fluorourasil ve paclitaxele maruz bırakıldı. Daha önce lösemi hastalarında ilacın hücreler arası sıvı konsantrasyonunun hastanın hayatta kalması ile ilişkili olduğu gösterilmişti. 293MRP hücreleri, kliniğe uygun dozlarda doxorubicin ve vincristine karşı atasal HEK293 hücrelerine göre daha dirençliydi. Bu durumun tersine, 293 MRP hücreleri paclitaxel, 5-fluorourasil, etoposide ve gemcitabine daha hassastılar. Sonuçlarımız fonksiyonel ve aktif MRPl'i eksprese eden bir böbrek hücre dizisinin oluşturulduğunu göstermektedir. Direnç çalışmaları böbrek tümörlerinde doxorubicin ve vincristinin MRP1 için substratlar olduğunu düşündürmektedir. Aksine, etoposide, 5FU, gemcitabine ve özellikle paclitaxel MRP1 aşırı eksprese eden böbrek tümörlerinin kemoterapi uygulamalarında kullanılabilir. Hastaların MRP1 ekspresyon düzeylerinin değerlendirilmesinde flow sitometrik analizlerin kullanılabileceği de çalışmamızla gösterilmiştir.
