Kültüre edilmiş rat aortik düz kas hücrelerinde anjiyotensin II uyarımı ile p42-p44 mapk (erk-1/2) fosforilasyonunda fosfolipaz C ve protein kinaz C’nin rolü

Abstract

Renin-anjiotensin sisteminin aktif bir komponenti olan Anjiyotensin II (Ang II), hipertansiyon, aterosklerozis, kardiovasküler sistem hastalıkları ve kan basıncının kontrolünde önemli bir rol oynar. Ang H'nin vasküler düz kas hücrelerinde ATİ reseptörleri üzerinden G proteinine bağlı reseptörler aracılığıyla farklı sinyal iletim yollarım uyararak ERK 1/2 olarakta bilinen p42/p44 Mitojen Aktive edici Protein Kinaz (MAPK)'ları aktif hale geçirir. Ang II ile uyaran sonrasında hemen işleyen sinyal iletiminde G proteinleri aracılığıyla fosfolipaz C (PLC) aktive olur ve fosfatidil inositolün hidrolizi ile inositol trifosfat (IP3) ve diaçilgliserol (D AG) oluşur. D AG, PKC'yi uyarırken IP3 hücre içi kalsiyum konsantrasyonunu yükseltir ve vasküler kontraksiyonlan başlattığı gibi MAPK aktive edebilir. Bu çalışmamızda ratların aortasından izole edilen vasküler düz kas hücreleri kültür ortamında üretildikten sonra Ang II ile uyarılarak p42/p44 MAPK fosforilasyonunda PLC ve PKC'nin etkisi araştırılmıştır. Rat aortasından izole edilen vasküler düz kas hücrelerinin saflığı immünohistokimyasal teknik kullanılarak ot- aktin varlığı ile gösterilmiştir. Ang II uyarımı ile p42/p44 MAPK fosforilasyonu western blot yöntemi ile, araştırmak istenilen her bir metabolik yol için uygun inhibitörler kullanılarak analiz edilmiştir. Sonuç olarak vasküler düz kas hücre kültürlerinde, Ang II uyarımı Ang H'nin ATİ reseptörü üzerinden MAPK aktivasyonunu hızlı bir şekilde arttırmıştır. Ang II indüklü MAPK aktivasyonu PLC inhibitörü olan U73122 ile tamamen baskılanmıştır. Ang II uyarımlı MAPK aktivasyonu üzerine PKC inhibitörü olan GF109203X'in herhangi bir etkisi saptanamamıştır. Her iki inhibitörün birlikte kullanımı Ang II uyarımlı MAPK aktivasyonu tamamen baskılamıştır.